{"id":112689,"date":"2019-01-19T22:39:45","date_gmt":"2019-01-19T22:39:45","guid":{"rendered":"https:\/\/food.r-biopharm.com\/news\/metodo-pcr-per-la-ricerca-degli-allergeni-alimentari-una-questione-controversa\/"},"modified":"2019-01-30T00:13:24","modified_gmt":"2019-01-30T00:13:24","slug":"metodo-pcr-per-la-ricerca-degli-allergeni-alimentari-una-questione-controversa","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/food.r-biopharm.com\/it\/news\/metodo-pcr-per-la-ricerca-degli-allergeni-alimentari-una-questione-controversa\/","title":{"rendered":"Metodo PCR per la ricerca degli allergeni: una questione controversa"},"content":{"rendered":"<p><strong>Per tutelare\u00a0la sicurezza nutrizionale del\u00a0consumatore allergico, \u00e8 obbligatorio riportare in etichetta la presenza degli allergeni alimentari. \u00a0La maggior parte dei laboratori, per la ricerca degli allergeni negli alimenti, utilizza metodi immunologici come i test ELISA. L&#8217;uso della PCR invece \u00e8 una questione\u00a0piuttosto controversa \u00a0&#8211; tuttavia, tale metodo svolge un ruolo centrale nella gestione degli allergeni. Scopriamo insieme il motivo.<\/strong><\/p>\n<p><!--more--><\/p>\n<p>Le allergie alimentari sono un tipo di intolleranza in cui sostanze specifiche scatenano una reazione immunologica. La reazione allergica \u00e8 causata da proteine. Per la ricerca degli allergeni negli alimenti i metodi immunologici, che hanno come target una proteina specifica, \u00a0sono la scelta pi\u00f9 ovvia. Inoltre, tali sistemi sono ben consolidati per l\u2019analisi degli allergeni e sono considerati il gold standard. Tuttavia, in base alla Direttiva Europea (1169\/2011), i produttori di alimenti devono riportare in etichetta l&#8217;ingrediente e non la specifica proteina allergenica. Ci\u00f2 significa che i metodi di rilevazione non devono mirare alla proteina specifica \u2013 pertanto si possono applicare anche altri metodi analitici come l&#8217;analisi del DNA. Solo per il glutine, il Codex Alimentarius raccomanda \u00a0l&#8217;uso di un test ELISA (metodo R5-Mendez).<\/p>\n<h3 class=\"knubbel\">Principio di base dell&#8217;analisi PCR<\/h3>\n<p>La reazione a catena della polimerasi (PCR) \u00e8 un metodo di biologia molecolare basato sulla duplicazione e l&#8217;analisi di specifiche sequenze di DNA. Per maggiori informazioni guarda il nostro video. La PCR consente di determinare se in un alimento \u00e8 presente specifico DNA animale o vegetale ed \u00e8 quindi spesso utilizzata per l&#8217;identificazione di specie animali e per l&#8217;individuazione di batteri, virus ed organismi geneticamente modificati. <a href=\"https:\/\/www.youtube.com\/watch?v=C6pHZXFXq1c\">https:\/\/www.youtube.com\/watch?v=C6pHZXFXq1c<\/a>Tuttavia nell&#8217;analisi degli allergeni, l\u2019utilizzo del metodo PCR \u00e8 una questione controversa. Il principale punto critico riguarda il fatto che la PCR \u00e8 solo un indicatore indiretto del potenziale allergenico di un prodotto alimentare: \u00e8 infatti probabile che un prodotto alimentare (trasformato) contenga poco o nessun DNA, ma ancora una grande quantit\u00e0 di proteina allergenica.<\/p>\n<h3 class=\"knubbel\">Vataggi dell&#8217;analisi PCR<\/h3>\n<p>Nonostante questa osservazione, il metodo PCR \u00e8 adatto per la ricerca degli allergeni e, in alcuni casi, \u00e8 persino superiore all\u2019 ELISA, in particolare per quanto riguarda la specificit\u00e0 e il multiplexing.<\/p>\n\n<table id=\"tablepress-68\" class=\"tablepress tablepress-id-68\">\n<thead>\n<tr class=\"row-1\">\n\t<td class=\"column-1\"><\/td><th class=\"column-2\">PCR<\/th><th class=\"column-3\">ELISA<\/th>\n<\/tr>\n<\/thead>\n<tbody>\n<tr class=\"row-2\">\n\t<td class=\"column-1\">Rilevazione di<\/td><td class=\"column-2\">DNA<\/td><td class=\"column-3\">Proteine<\/td>\n<\/tr>\n<tr class=\"row-3\">\n\t<td class=\"column-1\">Sensibilit\u00e0<\/td><td class=\"column-2\">Da alta a molto alta; sono possibili effetti matrice<\/td><td class=\"column-3\">Da alta a molto alta; sono possibili effetti matrice<\/td>\n<\/tr>\n<tr class=\"row-4\">\n\t<td class=\"column-1\">Specificit\u00e0<\/td><td class=\"column-2\">Molto alta<\/td><td class=\"column-3\">Media; sono possibili cross-reazioni<\/td>\n<\/tr>\n<tr class=\"row-5\">\n\t<td class=\"column-1\">Preparazione del campione<\/td><td class=\"column-2\">Standardizzata<\/td><td class=\"column-3\">Non standardizzata<\/td>\n<\/tr>\n<tr class=\"row-6\">\n\t<td class=\"column-1\">Procedura analitica<\/td><td class=\"column-2\">Molto efficiente durante l'esecuzione di test multipli; piuttosto complessa e costosa per i test singoli<\/td><td class=\"column-3\">Semplice e poco costosa<\/td>\n<\/tr>\n<tr class=\"row-7\">\n\t<td class=\"column-1\">Risultati<\/td><td class=\"column-2\">Qualitativi; possibile valutazione quantitativa utilizzando un ulteriore fattore di conversione<\/td><td class=\"column-3\">Quantitativi<\/td>\n<\/tr>\n<tr class=\"row-8\">\n\t<td class=\"column-1\">Automazione<\/td><td class=\"column-2\">Completamente automatizzabile<\/td><td class=\"column-3\">Parzialmente automatizzabile<\/td>\n<\/tr>\n<tr class=\"row-9\">\n\t<td class=\"column-1\">Analisi multiplex<\/td><td class=\"column-2\">Possibile (3 parametri contemporaneamente)<\/td><td class=\"column-3\">Non possibile<\/td>\n<\/tr>\n<tr class=\"row-10\">\n\t<td class=\"column-1\">Analisi di campioni processati<\/td><td class=\"column-2\">Possibile finch\u00e9 il DNA rimane intatto<\/td><td class=\"column-3\">Possibile finch\u00e9 la proteina target rimane intatta<\/td>\n<\/tr>\n<tr class=\"row-11\">\n\t<td class=\"column-1\">Tempo richiesto<\/td><td class=\"column-2\">2 - 3 ore<\/td><td class=\"column-3\">0.5 - 2 ore<\/td>\n<\/tr>\n<\/tbody>\n<\/table>\n<!-- #tablepress-68 from cache -->\n<h3 class=\"knubbel\">Limiti dell\u2019analisi PCR per la ricerca di allergeni<\/h3>\n<p>Il metodo PCR \u00e8 quindi un eccellente complemento alla tecnologia ELISA, in particolare come test di conferma o per la rilevazione di specifici parametri quali sedano o pesce, in cui l\u2019 ELISA mostra un\u2019elevata reattivit\u00e0 crociata. Tuttavia, la PCR ha i suoi limiti: non consente di rilevare latte e uova poich\u00e9 tale metodo rileva solo il DNA di mucca o di pollo. E anche se il DNA \u00e8 una molecola altamente stabile, non resiste a tutti i processi di produzione: alimenti altamente trasformati come oli vegetali, gelatina, lecitina o amido contengono poco o nessun DNA e rappresentano una sfida per i metodi PCR. In generale, tutti i metodi disponibili hanno i loro pro e contro e la decisione su quale utilizzare dipende sempre dall&#8217;applicazione specifica.<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Per tutelare\u00a0la sicurezza nutrizionale del\u00a0consumatore allergico, \u00e8 obbligatorio riportare in etichetta la presenza degli allergeni alimentari. \u00a0La maggior parte dei laboratori, per la ricerca degli allergeni negli alimenti, utilizza metodi immunologici come i test ELISA. 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