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Coluna seletiva de heparina para um novo ingrediente alimentar

A Decisão de Execução da Comissão de 22 de novembro de 2012 autorizou o uso da lactoferrina bovina como um novo ingrediente alimentar. Trata-se de uma glicoproteína com afinidade por ferro, de aproximadamente 77 kDa, encontrada no leite, que pode oferecer diversos benefícios à saúde, incluindo o fortalecimento da imunidade, melhora da saúde intestinal e proteção contra infecções.
A autorização para o uso da lactoferrina bovina específica sua aplicação como ingrediente em uma ampla variedade de produtos — majoritariamente derivados lácteos — como fórmulas infantis, bebidas à base de leite e leite fermentado (incluindo bebidas lácteas tipo iogurte), produtos à base de queijo, sorvetes, bolos e confeitaria, doces e chicletes. Os níveis máximos de uso variam de 100 mg/100 mL em fórmulas infantis até 1% em bolos e confeitaria, 2% em produtos à base de iogurte e 3% em peso em chicletes. Comercialmente, a principal aplicação da lactoferrina é em fórmulas infantis.
Apesar do histórico consolidado de uso da lactoferrina bovina, foi apenas recentemente que a indústria de fórmulas infantis manifestou a necessidade de um método oficial de análise para resolução de disputas. Um Comitê de Métodos da AOAC International estabeleceu os Requisitos de Desempenho de Métodos Padrão (SMPRs®) para a determinação de lactoferrina bovina em fórmulas nutricionais para lactentes, adultos e crianças, os quais foram publicados em 2020. Os requisitos estabeleciam um limite de quantificação (LOQ) de 4 mg/100 g, recuperação entre 90–100% e precisão entre 6–9%.
Inicialmente, um método da AOAC com status de Final Action, baseado em biossensor, foi aprovado em 2024. Posteriormente, foi adotado um método utilizando cromatografia líquida de alta eficiência com coluna de heparina (First Action 2021.10). Este método validado em laboratório único emprega extração por coluna de afinidade com heparina, seguida de cromatografia líquida de alta eficiência em fase reversa com detecção por ultravioleta (HPLC/UV).
A R-Biopharm Rhône lançou recentemente o EASI-BIND®LACTOFERRIN , uma coluna de afinidade com heparina reutilizável até dez vezes.
Embora esta coluna não tenha sido utilizada no estudo original de validação em laboratório único da AOAC, ela apresenta equivalência e, quando empregada no método First Action, atende plenamente a todos os requisitos SMPR da AOAC. A principal vantagem da utilização de colunas de afinidade está em sua alta especificidade, o que permite a fácil transferência do método de análise da fórmula infantil para outras matrizes alimentares, conforme as futuras demandas da indústria alimentícia.