Colonne sélective à l’héparine pour le dosage de la lactoferrine

Décision d’exécution de la Commission du 22 novembre 2012 autorisant l’utilisation de la lactoferrine bovine comme nouvel ingrédient alimentaire.

La lactoferrine bovine est une glycoprotéine de liaison au fer d’environ 77 kDa présente dans le lait, qui pourrait offrir de nombreux bénéfices pour la santé, notamment l’amélioration de l’immunité, une meilleure santé intestinale et une protection contre les infections. L’autorisation précise les utilisations permises de cette substance en tant qu’ingrédient dans une large variété de produits principalement à base de lait, tels que les préparations pour nourrissons, les boissons à base de lait et de lait fermenté, y compris les yaourts à boire, les produits à base de fromage, les glaces, les gâteaux et pâtisseries, les confiseries et les chewing-gums.

Les niveaux d’utilisation autorisés vont de 100 mg/100 mL dans les préparations pour nourrissons jusqu’à 1 % dans les gâteaux et pâtisseries, 2 % dans les produits à base de yaourt et 3 % en poids dans les chewing-gums. Commercialement, l’utilisation principale de la lactoferrine concerne les préparations pour nourrissons.

Ce n’est que relativement récemment que l’industrie des préparations pour nourrissons a exprimé le besoin d’une méthode officielle d’analyse pour réaliser un dosage fiable de la lactoferrine. L’AOAC International (Association of Official Analytical Collaboration) a établi des exigences de performance standardisées (SMPRs®) pour la détermination de la lactoferrine bovine dans les préparations nutritionnelles pour nourrissons, adultes et enfants, publiées en 2020. Ces exigences stipulaient une limite de quantification (LOQ) de 4 mg/100 g, un taux de récupération compris entre 90 et 100 %, et une précision entre 6 et 9 %. Une méthode AOAC « Final Action » utilisant un biosenseur a été approuvée en 2024, suivie d’une méthode par chromatographie HPLC avec colonne à héparine (First Action 2021.10). La méthode validée en laboratoire utilise une extraction sur colonne à héparine, suivie d’une chromatographie liquide haute performance en phase inversée avec détection UV (HPLC/UV). La colonne à héparine permet de concentrer et de purifier la protéine afin d’en améliorer la détection.

Récemment, R-Biopharm Rhône a lancé EASI-BIND® LACTOFERRIN, une colonne à héparine réutilisables jusqu’à 10 fois.

Bien que cette colonne n’ait pas été utilisée dans l’étude de validation initiale de l’AOAC, elle présente une équivalence. Lorsqu’elle est utilisée avec la méthode « First Action« , elle répond à toutes les exigences de performance de l’AOAC. L’intérêt d’utiliser des colonnes d’affinité réside dans leur grande spécificité, qui facilite le transfert de méthode depuis les préparations pour nourrissons vers d’autres matrices, comme le demandera probablement l’industrie agroalimentaire dans le futur.