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Legionella: rilevazione automatizzata in RT-PCR
La Legionella è un batterio gram-negativo che può provocare un’infezione polmonare grave, conosciuta come legionellosi, che può manifestarsi in forme acute e, in alcuni casi, fatali. La specie più comune, Legionella pneumophila, è responsabile della maggior parte dei casi di malattia negli esseri umani. L’infezione si sviluppa in ambienti ad alta concentrazione di acqua stagnante o calda, rendendo la gestione della qualità dell’acqua cruciale per prevenire il rischio di contaminazione.
Dove si trova la Legionella?
La Legionella è comunemente presente in ambienti acquatici naturali, come fiumi e laghi, ma può proliferare anche in ambienti artificiali come impianti idrici, sistemi di raffreddamento dell’aria (come le torri di raffreddamento), fontane ornamentali, vasche idromassaggio e tubazioni d’acqua stagnante. La Legionella prospera particolarmente in acque calde, con temperature comprese tra i 20°C e i 45°C.
Come si diffonde la Legionella?
La trasmissione della Legionella avviene principalmente tramite l’inalazione di aerosol contenenti il batterio, generati da fonti di acqua contaminata, come docce, rubinetti, impianti di condizionamento e vasche idromassaggio. È importante sottolineare che il batterio non si trasmette da persona a persona, ma esclusivamente tramite esposizione all’acqua contaminata.
Sintomi e Malattia
L’infezione da Legionella può manifestarsi in due forme principali:
- Malattia del legionario: una grave polmonite che può causare febbre alta, tosse, difficoltà respiratorie e dolore al petto. Se non trattata tempestivamente, può essere fatale.
- Febbre di Pontiac: una forma meno grave, con sintomi simili a quelli di un’influenza (febbre, mal di testa, dolori muscolari). Solitamente, non causa polmonite e si risolve spontaneamente in pochi giorni.
Prevenzione e controllo della diffusione della Legionella
Le principali misure preventive contro la Legionella includono:
- Monitoraggio regolare della qualità dell’acqua negli impianti idrici
- Pulizia e disinfezione periodica di torri di raffreddamento e altri sistemi ad acqua.
- Mantenimento dell’acqua a temperature che non favoriscono la crescita del batterio (superiori a 60°C).
Obblighi per le Aziende e Normativa Europea
Secondo la Direttiva UE 2020/2184 concernente la qualità delle acque destinate al consumo umano, tutte le strutture (sia civile che industriale) con impianti ad alto rischio di contaminazione da Legionella devono eseguire analisi regolari dell’acqua. Il limite stabilito per la presenza di Legionella è di 1.000 unità formanti colonie (UFC) per litro d’acqua.
In caso di rilevamento della Legionella, è obbligatorio segnalarlo al Servizio d’igiene e sanità pubblica dell’ASL competente.
Metodi di Analisi Ambientale per la Legionella
Per monitorare la presenza di Legionella, sono disponibili due metodi analitici principali:
- Coltura microbiologica
La coltura microbiologica è il metodo tradizionale e di riferimento per rilevare la Legionella (ISO 11731). Prevede il prelievo di campioni d’acqua che vengono poi inoculati su terreni specifici (agar a base di carbone) e incubati a temperature ottimali per la crescita del batterio. Sebbene sia un metodo altamente sensibile, l’analisi colturale richiede tempi lunghi (fino a 10 giorni) per fornire risultati e non è sempre in grado di identificare tutte le specie di Legionella.
- Real-Time PCR
La Real-Time PCR (Polymerase Chain Reaction) è una tecnica molecolare che consente di amplificare e identificare il DNA di Legionella, anche a basse concentrazioni, in campioni di acqua (ISO 12869). Questo metodo risulta molto più rapido rispetto alla coltura, con risultati in poche ore, e offre anche una maggiore sensibilità, riuscendo a identificare diverse specie di Legionella.
Soluzioni Avanzate di R-Biopharm: RT-PCR e Automazione
Con l’aumento delle richieste di analisi rapide e precise per la rilevazione di Legionella, soluzioni avanzate come la RT-PCR stanno diventando sempre più diffuse.
Metodo RT-PCR Automatizzato
L’estrazione del DNA della Legionella da campioni di acqua può essere completata in soli 50 minuti in totale automazione grazie agli strumenti M4810 e Switch 8.
Utilizzando il kit SureFast® Legionella Screen PLUS per l’amplificazione del DNA, conforme alla ISO 12869, è possibile rilevare la Legionella in meno di due ore, con un intervento minimo da parte dell’operatore. Il kit contiene inoltre un controllo positivo interno (1.000 CFU/1L) conforme alla normativa vigente.
Vantaggi dell’Automazione
- Velocità e Affidabilità: I risultati sono disponibili in poche ore, aumentando l’efficienza e la tempestività
- Compatibilità e Integrazione: I kit di amplificazione sono compatibili con tutti i termociclatori presenti in commercio e con lo strumento RIDA®CYCLER di R-Biopharm, dotato di software intuitivo e settaggi termici pre-impostati per un processo analitico semplificato e automatizzato.