La PCR è importante per l’analisi del glutine?

Il metodo ELISA RIDASCREEN® Gliadin è il metodo di riferimento, in quanto rileva direttamente le proteine del glutine.   

Perchè si dovrebbe usare la PCR?

• Solo la PCR consente di differenziare i cereali nei test sul glutine. Il metodo più utilizzato è l’ELISA che si basa sulla rilevazione di proteine. Tuttavia, con l’analisi del DNA è possibile distinguere i diversi cereali. Con il nostro test RT-PCR SureFood® ALLERGEN 4plex Cereals vengono rilevati in modo indipendente il grano, l’orzo e la segale.
• La PCR rileva anche l’avena, oltre a grano, segale e orzo. Mentre il test ELISA RIDASCREEN® Gliadin non rileva l’avena, il kit RT-PCR SureFood® ALLERGEN Gluten rileva l’avena e altri cereali contenenti glutine. Il kit può essere utilizzato anche per la conferma dei risultati ELISA.      
• Rilevazione individuale e specifica dell’avena. Il kit RT-PCR SureFood® ALLERGEN Oat determina la presenza o l’assenza di avena, importante per la corretta etichettatura degli alimenti.        

Tabella 1: Panoramica dei kit qPCR e dei loro campi di applicazione

R-Biopharm: il tuo esperto per le analisi del glutine

R-Biopharm è leader mondiale nel settore dei test sul glutine e offre la più ampia gamma di sistemi di analisi per la rilevazione del glutine. Produttori di alimenti, laboratori e altri fornitori di servizi utilizzano la nostra ampia gamma di kit, affidabili e precisi, per l’analisi del glutine in tutto il mondo.

Che cos’è il glutine e perché l’analisi del glutine negli alimenti è oggetto di particolare attenzione?

Il glutine è una miscela proteica presente in cereali come il grano, la segale e l’orzo. L’avena è una questione controversa: secondo l’Australia New Zealand Food Standards Code, l’avena e i prodotti che la contengono non possono essere etichettati come privi di glutine.

Ci sono persone che soffrono di un’intolleranza permanente al glutine, nota come celiachia, che porta all’infiammazione dell’intestino tenue. L’unica opzione terapeutica per la celiachia è una dieta rigorosamente priva di glutine.

Secondo il Codex Alimentarius (CODEX STAN 118-1979), gli alimenti sono “senza glutine” se contengono < 20 mg/kg di glutine. Il valore limite di 20 mg/kg di glutine è stato recepito in molte legislazioni nazionali.

Il CODEX raccomanda inoltre di utilizzare il metodo “R5 Méndez ELISA” per la rilevazione della gliadina/glutine negli alimenti senza glutine. Il metodo “R5 Méndez ELISA” è un metodo di Tipo I del Codex Alimentarius. La classificazione di Tipo I gli conferisce lo status di metodo di riferimento. R-Biopharm è l’unico produttore di R5 ELISA che offre la Cocktail (brevettata) (art. n. R7006 / R7016) e soddisfa quindi al 100% i requisiti del metodo di riferimento.

Panoramica dei metodi: qual è il metodo giusto per te?

R-Biopharm offre test rapidi a flusso laterale, test ELISA e RT-PCR, come si può vedere nella tabella sottostante. Quando è opportuno utilizzare un metodo piuttosto di un altro?

• Test a flusso laterale per superfici e alimenti. Vuoi sapere rapidamente se le superfici dei tuoi impianti di produzione o dei tuoi stabilimenti sono state sufficientemente pulite? Allora utilizza i nostri esclusivi test a flusso laterale RIDA®QUICK Gliadin basato sull’anticorpo R5, che possono essere eseguiti senza attrezzature di laboratorio. Tampona direttamente le superfici con la striscia: il controllo della pulizia non è mai stato così semplice. Inoltre, è possibile verificare rapidamente se gli alimenti contengono o meno glutine.        
  
• Gamma di test ELISA per l’analisi del glutine negli alimenti. A seconda delle esigenze, R-Biopharm offre una varietà di sistemi ELISA per il glutine, tra cui il test ELISA RIDASCREEN® Gliadin, il metodo più utilizzato e validato per la rilevazione del glutine.    
  
• Test RT-PCR per la conferma e l’identificazione delle specie. La PCR è un metodo molto sensibile e specifico, che consente misurazioni qualitative e quantitative.

Tabella 2: Opzioni del metodo di rilevamento del glutine

Perché R-Biopharm offre così tanti kit per il test del glutine?

Il metodo ELISA RIDASCREEN® Gliadin è il metodo di riferimento per l’analisi del glutine. Tuttavia, alcuni clienti hanno bisogno di risultati più rapidi o più sensibili:

• RIDASCREEN® FAST Gliadin per un’analisi più rapida   
  
• RIDASCREEN®FAST Gliadin sensibile per un limite di rilevazione inferiore

La scelta del kit di analisi dipende anche fortemente dalla matrice alimentare e dalla sua lavorazione. Durante la cottura, la fermentazione e l’idrolisi, le proteine vengono spesso modificate. Questo ha un impatto sui metodi di rilevamento delle proteine, come LFD e ELISA, in riferimento alla preparazione dei campioni e all’utilizzo di un formato sandwich o ELISA competitivo:

• RIDASCREEN® Gliadin competitive per prodotti fermentati o idrolizzati come birra, sciroppo o lievito madre.
  
• RIDASCREEN® Total Gluten per la determinazione quantitativa del glutine intatto (non idrolizzato) di cereali contenenti glutine (grano, segale e orzo) nell’avena e nei prodotti a base di avena

Il DNA come analita è molto stabile. Pertanto, la preparazione del campione di DNA può essere applicata a quasi tutti gli alimenti ed è standardizzata nei nostri kit di analisi PCR:

• SureFood® PREP Advanced per la preparazione del DNA di tutti i tipi di alimenti, compresi quelli altamente trasformati.

• La quantificazione è possibile con SureFood® ALLERGEN Gluten utilizzando il materiale di riferimento SureFood® QUANTARD Allergen 40.

La tabella seguente evidenzia i diversi kit di analisi e le matrici alimentari

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