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Utilisation croissante des méthodes multi-mycotoxines pour les analyses de routine

La surveillance constante de la sécurité alimentaire devient de plus en plus critique car elle affecte la santé humaine et animale. Au cours de la dernière décennie, une attention considérable a été faite sur les mycotoxines ainsi que sur leurs métabolites secondaires. Ces toxines sont présentes dans l’alimentation humaine et animale et sont responsables d’effets cancérigènes et de diverses maladies. Leur présence est donc réglementée et les taux doivent être contrôlés par diverses méthodes en fonction des besoins. R-Biopharm est leader dans la fourniture de tests pour le contrôle des mycotoxines.

La réglementation européenne relative aux mycotoxines est complexe et comporte des limites variables s’appliquant à des produits spécifiques. Ceci, ajouté au fait que les mycotoxines peuvent coexister dans les produits, a créé une tendance croissante à l’analyse multi-mycotoxines au sein de l’industrie de l’alimentation humaine et animale. En conséquence, la demande de colonnes d’immuno-affinité multi-toxines a augmenté depuis plusieurs années. Pourquoi ? Pour concentrer et purifier les toxines et permettre d’atteindre des seuils de détection plus bas pour ainsi proposer une analyse fiable et conforme aux exigences de l’UE.

R-Biopharm Rhône propose des colonnes d’immuno affinité multi-mycotoxines telles que la 11+Myco MS-PREP ® permettant de concentrer et purifier plus de 11 mycotoxines ou plus en utilisant une seule méthode d’extraction. L’échantillon est extrait dans du méthanol puis il est dilué à une concentration appropriée, avant d’être appliqué à la colonne d’immunoaffinité avant injection dans le système LC-MS/MS. La composition de la solution d’extraction et la concentration du solvant appliquée sur la colonne d’immuno-affinité ont été optimisées pour garantir des taux de récupérations conformes pour les analytes hydrophiles telles que le DON et pour les analytes lipophiles telles que le ZON.

Les résultats obtenus (voir ci-dessous) sont en cohérence avec les exigences Européennes (UE 401/2006). Il est à noter que le fait de travailler sur des matrices purifiées retire dans la majorité des cas l’utilisation des standards radiomarqués restants couteux.

Figure 1: Résultats obtenus sur diverses matrices dopées aux niveaux législatifs de l’UE et purifiés à l’aide de la colonne d’immuno-affinité 11+Myco MS-PREP®

Spiked % Recovery (ppb) (%RSD)

AnalyteMaize 1Maize 2SilageForageSmall Animal ForageDDGS
Aflatoxin G2108.4 (3.0)96.6 (15.3)83.1 (3.6)80.2 (6.0)75.1 (7.3)N/A
Aflatoxin G1103.1 (1.3)106.9 (7.4)85.7 (3.6) 94.1 (9.6)83.3 (5.1)N/A
Aflatoxin B2105.9 (1.9)107.9 (11.2)81.4 (3.0)84.3 (6.0)80.8 (6.3)98.1 (4.1)
Aflatoxin B189.8 (7.7)135.3 (5.4)87.2 (11.6)94.0 (7.0)76.8 (5.3)94.3 (3.2)
Total AFT101.8 (1.8)111.8 (10.8)----
Ochratoxin A99.2 (17.1) 101.4 (17.3)82.2 (4.3)86.0 (4.0)83.7 (4.5)94.3 (3.4)
Fumonisin B190.3 (9.6) 78.0 (19.5)83.7 (6.1)84.6 (3.1)80.8 (1.9)N/A
Fumonisin B290.3 (10.0)99.7 (19.3)88.9 (4.3)86.7 (3.4)86.5 (5.5)N/A
Total FUM90.3 (8.6)85.2 (17.9)----
Deoxynivalenol98.6 (16.2)97.6 (13.4)89.4 (0.2)85.4 (1.7)87.0 (0.8)N/A
Zearalenone94.8 (17.8)115.6 (10.6)102.1 (3.6)103.0 (1.5)98.6 (1.4)N/A
T-2101.8 (6.9)104.0 (20.1)86.7 (1.2)87.6 (3.5)83.1 (5.3)91.4 (0.9)
HT-2125.1 (1.2)124.6 (10.1)90.7 (3.9)87.5 (3.1)89.7 (2.8)97.7 (8.6)
Total T-2 / HT-2113.4 (3.4)114.3 (7.9)----

Pour conclure, nous pouvons dire que les méthodes multi-toxines avec utilisation des colonnes d’immuno-affinité deviennent de plus en plus populaires en raison des performances analytiques qu’elles permettent d’atteindre. La purification en amont de l’injection dans la chaine chromatographique limite aussi l’encrassement du système.

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